Kiểm tra Coombs
Thử nghiệm Coombs là gì?
Xét nghiệm Coombs được sử dụng để phát hiện các kháng thể chống lại các tế bào hồng cầu (hồng cầu). Một cái gọi là huyết thanh Coombs được sử dụng để xác định kháng thể. Nó được lấy từ huyết thanh của thỏ và nhạy cảm với kháng thể của người.
Xét nghiệm này được sử dụng nếu thiếu máu tan máu, không tương thích với máu hoặc ngay trước khi nghi ngờ truyền máu. Thiếu máu tan máu là một dạng của bệnh thiếu máu và sự không tương thích rhesus mô tả sự không tương thích nhóm máu.
Có hai loại kiểm tra Coombs khác nhau, kiểm tra trực tiếp và gián tiếp khác nhau về chỉ định và cách thực hiện.
Lý do cho một bài kiểm tra Coombs
Xét nghiệm Coombs trực tiếp được sử dụng nếu nghi ngờ thiếu máu tan máu. Thiếu máu tan máu mô tả tình trạng thiếu máu trong đó các tế bào máu bị phá vỡ sớm do bị tổn thương.
Trong các bệnh tự miễn như lupus ban đỏ hệ thống, viêm khớp dạng thấp hoặc bệnh bạch cầu mãn tính, các kháng thể được hình thành để chống lại các tế bào máu của chính cơ thể (còn gọi là hồng cầu). Sự liên kết của các kháng thể dẫn đến sự phân hủy sớm của các tế bào máu hoặc sự kết tụ của các tế bào máu trong mạch. Cả hai điều này đều dẫn đến giảm giá trị hemoglobin.
Một dấu hiệu khác cho xét nghiệm Coombs trực tiếp là bệnh haemolyticus neonatorum, ở đây các kháng thể chống lại yếu tố rhesus được hình thành trong cơ thể của người mẹ âm tính với rhesus. Nếu thai nhi dương tính với rhesus, các kháng thể từ mẹ có thể xâm nhập vào hệ tuần hoàn của thai nhi và bắt đầu quá trình phá vỡ các tế bào máu ở đó. Trẻ sơ sinh nổi bật với tình trạng thiếu máu nặng và vàng da.
Xét nghiệm Coombs được sử dụng thường xuyên trong y học truyền máu. Nó được sử dụng để xác định nhóm máu trước khi truyền máu (xét nghiệm tại giường), trong đó một mẫu máu nhỏ được trộn với nhiều huyết thanh khác nhau từ các nhóm máu A, B, AB và 0. Nếu máu vẫn còn dịch nghĩa là máu của bệnh nhân tương thích với nhóm máu tương ứng. Việc truyền máu có thể được thực hiện.
Xét nghiệm Coombs gián tiếp cũng có thể được sử dụng để tìm kiếm các kháng thể tự do trong cơ thể bệnh nhân (xét nghiệm tìm kiếm kháng thể), ví dụ: trong khi khám thai, để chuẩn bị truyền máu cho bệnh nhân ung bướu hoặc những người đã được truyền máu.
Tìm hiểu tất cả về chủ đề tại đây: Rh không dung nạp.
Sự chuẩn bị
Để chuẩn bị cho xét nghiệm Coombs, huyết thanh với các kháng thể cần được xét nghiệm được chuẩn bị trước. Chúng được đổ đầy vào các ống nghiệm khác nhau hoặc áp dụng cho phiếu thử nghiệm.
Trong thực hành lâm sàng hàng ngày, v.d. với bài kiểm tra đầu giường đã có sẵn phiếu kiểm tra và có thể sử dụng ngay. Tiếp theo, máu được lấy từ bệnh nhân và chuẩn bị cho xét nghiệm. Tùy thuộc vào loại xét nghiệm Coombs được thực hiện, người ta cần các tế bào máu hoặc huyết thanh (phần lỏng của máu) của bệnh nhân.
Trình tự
Nếu xét nghiệm Coombs trực tiếp được thực hiện, các tế bào hồng cầu được lọc ra khỏi máu của bệnh nhân. Nó phải được kiểm tra xem có kháng thể loại IgG trên chúng, gây thiếu máu tán huyết hoặc không tương thích nhóm máu trong cơ thể. Huyết thanh Coombs chứa các kháng thể chống lại các kháng thể IgG của người. Hỗn hợp được đun nóng (ủ) trong thời gian dài. Nếu có kháng thể trên các tế bào hồng cầu, chúng kết tụ lại và xét nghiệm trở nên dương tính.
Thử nghiệm Coombs gián tiếp bao gồm hai phần. Mục đích là để xác định các kháng thể tự do trong máu và không liên kết với các tế bào máu.
Lần này phần chất lỏng (huyết thanh) được lọc từ máu của bệnh nhân. Đầu tiên, các tế bào hồng cầu được thêm vào huyết thanh để thử nghiệm. Nếu có kháng thể tự do trong huyết thanh, chúng sẽ liên kết với hồng cầu. Phản ứng này không nhìn thấy được. Chỉ trong bước thứ hai, như trong thử nghiệm Coombs trực tiếp, huyết thanh Coombs có kháng thể chống lại kháng thể của con người được thêm vào và làm ấm. Ở đây, dung dịch sẽ đông lại nếu kết quả là dương tính.
Đánh giá
Nếu các kháng thể được kết hợp với một huyết thanh Cooms phù hợp, các kháng thể trong huyết thanh (phần lỏng của máu) sẽ liên kết với các kháng thể của bệnh nhân. Các kháng thể có hình chữ Y, có nghĩa là chúng luôn có thể liên kết hai đối tác liên kết và do đó liên kết chéo các tế bào hồng cầu với nhau. Một sự tích tụ lớn của các tế bào máu được tạo ra. Những cục này trở nên có thể nhìn thấy - máu kết tụ (cục) và kết quả xét nghiệm là dương tính.
Nếu bệnh nhân không có các kháng thể thích hợp, huyết thanh vẫn ở dạng lỏng. Bạn không thể thấy bất kỳ sự thay đổi nào - kết quả là âm tính.
Các lựa chọn thay thế là gì?
Một phương pháp thay thế cho xét nghiệm Coombs là phương pháp ELISA miễn dịch (xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym), trong đó một số kháng thể nhất định được đánh dấu bằng enzym. Kháng thể này được thêm vào dung dịch thử nghiệm. Nếu các kháng thể được đánh dấu phản ứng với các kháng thể trong dung dịch thử nghiệm, thì enzym liên kết sẽ được kích hoạt và tạo ra thuốc nhuộm. Các ống nghiệm tương ứng đổi màu - kết quả là dương tính.
Ngoài quy trình ELISA, còn có WESTERN blot, thường được sử dụng làm xét nghiệm khẳng định ELISA dương tính.